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雷速体育:天津工生所在酿酒酵母基因组多样性编辑方面取得进展

  酿酒酵母作为合成生物学重要的底盘细胞之一,可用于开发传统酿造食品、大宗化学品和高附加值产品。基因组编辑技术的发展,为加快酿酒酵母细胞工厂的构建与优化提供了强有力的使能技术,但当前研究集中于编辑工具本身的优化和同源重组介导的精准编辑。关于利用基因组编辑技术进行NHEJ介导的致基因组多样性突变和可遗传转录调控的研究鲜有报道,这主要受限于酿酒酵母NHEJ修复引入突变能力较差。 

  近日,雷速体育天津工业生物技术研究所研究员王钦宏带领的进化与代谢工程研究团队,基于酿酒酵母内源的双链DNA断裂(DNA double-strand break,DSB)修复途径设计改造和CRISPR基因组编辑,建立了不依赖模板的高效致突变基因组技术(mutagenic Genome Editing,mGE),并实现靶向基因的可遗传多样性调控表达。研究评价和比较DNA修复途径中9个关键基因的敲除、过表达或氨基酸突变等16个改造对4种常用编辑工具(CRISPR/Cas9、CRISPR/Cpf1、TALENs、CRISPR/Cas9-N863A)在没有外源DNA模板的情况下引入随机突变能力的影响发现,调整DNA修复蛋白,特别是Mre11、Sae2Exo1DSB末端切除蛋白显著增强不同基因组编辑工具引入突变的效率和多样性。在此基础上,研究利用MRE11-H125NMRE11核酸酶活性失活的等位基因)和CRISPR/Cpf1组合形成致基因组多样性编辑策略,并通过调节FPS1GPD1的表达有效提高乙醇生产能力。该研究将扩大基因组编辑在基因表达多样化和增强基因组进化中的应用。 

  相关研究成果发表在Microbiology Spectrum。研究工作得到天津市合成生物技术创新能力提升行动项目、中科院科研装备研制项目、国家自然科学基金等的支持。 

  论文链接 

调控酿酒酵母DSB修复途径实现基因组多样性编辑 

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